Comparative study of the oil repellent activity of Copaifera officinalis Linnaeus and Copaifera reticulata Ducke front nymphs of Periplaneta americana Linnaeus

Abstract To control urban pests, especially cockroaches of the Periplaneta americana species, various pesticides have been developed that are increasingly potent and effective. However, the unrestrained application of pesticides has had negative consequences, such as the disappearance of some useful insect species and, consequently, the appearance of new pests, both in the countryside and cities. Due to the current scenario, it was necessary to search for new alternatives for the control of these insects. Among the species studied, Copaíba stood out. The oils were analyzed using GC-MS, b-caryophyllene and a-bergamotene being the predominant compounds. Repellency tests were performed with three different concentrations of C. officinalis and C. reticulata, 500 μg/mL, 250 μg/mL and 125 μg/mL, in triplicate. It can be observed that the oil of C. officinalis was more repellent to the nymphs at concentrations of 500 μg/mL and 250 μg/mL, however, when the behavior in nymphs exposed to the concentration of 125 μg/mL was compared, it was noted that C. reticulata oil was more repellent at this concentration. Copaifera has shown promising activity as a repellent against arthropods owing to the complex chemical composition of its oils.

Anti-inflammatory effects and acute oral toxicity of Copaifera spp. essential oil-loaded nanoemulsion / Efectos antiinflamatorios y toxicidad oral aguda de nanoemulsión cargada de aceite esencial de Copaifera spp

Copaifera spp. essential oil (EOC) was extracted by hydrodistillation of Copaifera oleoresin (COR). The EOC was characterized by GC/MS and a novel EOC-loaded nanoemulsion was developed to enhance the EOC solubility and to evaluate its utility as antinflammatory. EOC contain 14 volatile compounds (including ß-caryophyllene: 51.52%) having a required HLB of 11. The Surfactant: EOC: Water ratio of 13:15:75 (%, w:w:w) produced the optimal formulation (particle size: 94.47 nm). The EOC-loaded nanoemulsion presented a pseudoplastic/thixotropic behavior with excellent shelf stability for 6 months. The anti-inflammatory effect of the nanoemulsion was more potent than that of the EOC, and statistically equal to diclofenac (50 mg/kg). The EOC-loaded nanoemulsion showed no oral acute toxicity (in mice) at 2000 mg/kg; hence, it is considered a nontoxic product. The development of the EOC-loaded nanoemulsion added value to both the COR and the EOC by providinga suitable formulation that could be used as an anti-inflammatory product.

El aceite esencial (EOC) fue extraído por hidrodestilación de oleoresina de Copaifera spp. El EOC fue caracterizado químicamente por GC/MS. Se formuló una nanoemulsión con EOC para mejorar la solubilidad del EOC y evaluar su utilidad como antiinflamatorio. El EOC contiene 14 compuestos volátiles (incluido el ß-cariofileno: 51,52%) con un HLB requerido de 11. La relación Tensioactivo: EOC: Agua de 13:15:75 (%, p:p:p) produjo la formulación óptima (tamaño de partícula: 94,47 nm).. La nanoemulsión cargada con EOC presentó un comportamiento pseudoplástico/tixotrópico con una excelente estabilidad en almacenamiento durante 6 meses. El efecto antiinflamatorio de la nanoemulsión fue más potente que el del EOC y estadísticamente igual al diclofenaco (50 mg/kg). La nanoemulsión cargada con COE no mostró toxicidad aguda oral (en ratones) a 2000 mg/kg; por lo tanto, se considera un producto no tóxico. El desarrollo de la nanoemulsión cargada con EOC agregó valor tanto al COR como al EOC al proporcionar una formulación adecuada que podría usarse como un producto antiinflamatorio.

Bovine digital dermatitis in the Brazilian Amazon biome and topical treatment with Copaifera reticulata oil / Dermatite digital bovina no bioma amazônico brasileiro e tratamento tópico com óleo de Copaifera reticulata

Bovine Digital Dermatitis (BDD) was studied in crossbred dairy cows grazing in Rondon do Pará, in the state of Pará, as well as in Açailândia and Cidelândia, in the state of Maranhão, Brazilian Amazon biome. The digits inspection from the dairy cows during milking was performed in ten farms comprising four visits (August and November 2016; April and July 2017). The cows were kept all year in pastures, and were mechanically milked on concrete floors and the animals were protected against the rains in eight farms, maintaining a daily cleaning, however, it could not be found a concrete floor in pre- or post-milking to ensure milking parlor on three farms. Manual milking on no concrete floors was performed in two farms. No preventive measures against hoof lesions were adopted. The BDD prevalence was 1.3% (22/1664), and no statistical difference among rainy or no rainy season was obtained (p = 0.72). The BDD lesions were classified according to "M system" (M0 = no lesion, M1 = active ulceration <2cm, M2 = active ulceration >2cm, M3 = healing stage, M4 = chronic stage, M4.1 = M4 with active ulceration). Regarding the 22 BDD lesions observed, 22.7% (5/22) were M1 stage, 36.4% (8/22) M2, 22.7% (5/22) M3, 13.6% (3/22) M4 and 4.5 (1/22) M4.1. Hypertrophic hairs at the edges of the lesions caused by fly larvae of genus Cochliomyia spp. as well as alterations on the hoof were also observed. Topical treatment was performed in six BDD lesions with a raw extract from trees of the genus Copaifera reticulata (Copaiba oil) and compared with the treatment of salicylic acid paste in five BDD lesions. The lesions were protected with a bandage for seven days and followed weekly until recovery. The complete therapeutic responses were 83.4% (5/6) and 75% (3/4), respectively, with an average time of seven weeks. The BDD in the Amazon biome occurs in low prevalence, not seasonal, and presents macro and microscopic features similar to BDD lesions from dairy cattle kept in free-stall housing. The treatment with copaiba oil showed similar results to the treatment of salicylic acid paste and can be used in control measures to BDD in the Amazon biome.(AU)

A dermatite digital bovina (DDB) foi estudada em vacas mestiças leiteiras nos municípios de Rondon do Pará no Pará, Açailândia e Cidelândia no Maranhão, bioma amazônico brasileiro. Para tanto, foram realizadas quatro visitas a 10 propriedades, nos meses de agosto e novembro em 2016 e abril e julho em 2017, e realizada a inspeção dos dígitos de 1.664 vacas em lactação durante a ordenha. Nestas propriedades as vacas eram criadas a pasto durante todo o ano e ordenhadas mecanicamente em oito propriedades. As quais, as salas de ordenha tinham piso concretado, com proteção contra as chuvas e era realizada a limpeza diariamente. No entanto, em três dessas propriedades, as salas de pré ou pós ordenha tinham piso não concretado e em duas, a ordenha era manual em piso de chão batido. Em todas elas não havia medidas profiláticas para afecções podais. A prevalência de DDB foi de 1,3% (22/1.664) e não se obteve diferença estatística entre os períodos chuvoso e não chuvoso (P = 0,72). As lesões observadas foram classificadas de acordo com o sistema M (M0-sem lesão; M1-lesão ulcerada <2cm; M2-lesão ulcerada >2cm; M3-lesão em cicatrização; M4-lesão crônica; M4.1- M4 com área ulcerada). De 22 lesões observadas, 22,7% (5/22) apresentavam-se em estágio M1, 36,4% (8/22) em M2, 22,7% (5/22) em M3, 13,6% (3/22) em M4 e 4,5% (1/22) em M4.1. Pelos hipertrofiados nos bordos das lesões, larvas de moscas do gênero Cochliomyia spp. e alterações no tecido córneo também foram observados. Nas lesões de 11 bovinos, em seis, foi realizado o tratamento tópico com extrato bruto de Copaifera reticulata (óleo de copaíba) e em cinco, com a pasta de ácido salicílico a 660mg/g e ambos os tratamentos foram protegidos com bandagem por sete dias. Após, as lesões foram acompanhadas semanalmente até a cura e obteve-se um índice de 83,4% (5/6) e 75% (3/4) de cura com esses tratamentos, respectivamente, com uma média de 7 semanas. Conclui-se que no bioma amazônico a DDB ocorre em baixa prevalência, não sazonal e com características macroscópicas semelhantes às lesões de vacas leiteiras criadas em sistema free stall. O tratamento com o óleo da copaíba apresentou resultados semelhante ao ácido salicílico e pode ser uma alternativa como medida de controle da DDB no bioma amazônico.(AU)

Natural killer activity of the spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice treated with Copaifera multijuga extract / Atividade natural killer das células esplênicas de camundongos portadores do tumor de Ehrlich tratados com extrato de Copaifera multijuga

AIMS: Copaifera multijuga Hayne oleoresin is commonly used in traditional medicine owing to its anti-inflammatory, antiseptic, antitumor, and antibacterial properties. However, little is known about the effect of the compounds from the bark of this plant. In this study, the immunomodulatory effect of the ethanolic extract of C. multijuga bark via natural killer activity of non-adherent spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice was evaluated. METHODS: Male Swiss mice were inoculated subcutaneously with 1×106 Ehrlich tumor cells (Ehrlich and Ehrlich/C. multijuga group) or phosphate buffered saline solution (control group and C. multijuga group) and treated orally daily with C. multijuga extract (200 mg kg-1, 0.1 mL per mouse, for the Ehrlich/C. multijuga and C. multijuga groups) or phosphate buffered saline solution (control group and Ehrlich group). The four experimental groups consisted in eight mice each and were organized in two sets, one treated for seven days and another treated for 14 days, totalizing 64 mice throughout the experiment. Twenty-four hours after the last oral administration, the mice were euthanized and the spleen tissue was isolated to prepare a non-adherent spleen cell suspension and to evaluate natural killer activity. Data are presented as the cell lysis percentage of Yac.1 target cells by non-adherent spleen cells. RESULTS: Treatment for seven days increased natural killer activity in the Ehrlich/C. multijuga group (21.20±8.89, p<0.05) compared to the control group (3.14±2.71, p<0.05); however, this effect was not maintained in the groups treated for 14 days (Control: 6.02±6.98, Ehrlich: 4.82±7.72, C. multijuga: 2.07±2.10, Ehrlich/C. multijuga: 2.01±1.63, p>0.05). CONCLUSIONS: Treatment for seven days with an ethanolic extract of C. multijuga bark enhanced the natural killer activity of non-adherent spleen cells from Ehrlich tumor-bearing mice.

OBJETIVOS: O óleo-resina de Copaifera multijuga Hayne é popularmente utilizado na medicina tradicional por suas propriedades antiinflamatória, antisséptica, antitumoral e antibacteriana. Entretanto, há poucos estudos sobre o efeito dos compostos obtidos da casca da planta. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato etanólico da casca da C. multijuga na atividade natural killer das células esplênicas não aderentes de animais portadores do tumor de Ehrlich. MÉTODOS: Camundongos Swiss machos foram inoculados subcutaneamente com 1×106 células do tumor de Ehrlich (grupo Ehrlich e Ehrlich/C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e C. multijuga) e tratados diariamente (gavagem) com extrato de C. multijuga (200 mg kg-1, 0,1mL cada um, para os grupos Ehrlich/C. multijuga e C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e grupo Ehrlich). Os quatro grupos experimentais consistiram de oito animais cada e foram organizados em dois conjuntos, um tratado por sete dias e outro tratado por 14 dias, totalizando 64 animais durante todo o experimento. Após 24 horas do término do tratamento, os animais foram eutanasiados para obtenção da suspensão de células esplênicas não aderentes e avaliação da atividade natural killer. Os resultados são apresentados como porcentagem da lise celular das células alvo Yac.1 pelas células esplênicas não aderentes. RESULTADOS: A análise dos resultados demonstrou que aos sete dias de tratamento a C. multijuga aumentou a atividade natural killer no grupo Ehrlich/C. multijuga (21,20±8,89, p<0,05) em comparação ao grupo controle (3,14±2,71, p<0,05), entretanto tal efeito não foi mantido nos grupos tratados por 14 dias (Controle: 6,02±6,98; EHR: 4,82±7,72; C. multijuga: 2,07±2,10; EHR/C. multijuga: 2,01±1,63, p>0,05). CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que o tratamento com o extrato etanólico da casca de C. multijuga favoreceu a atividade natural killer das células esplênicas não aderentes dos animais portadores do tumor de Ehrlich apenas aos sete dias de tratamento.

Insect galls in three species of Copaifera L. (Leguminosae, Caesalpinioideae) occurring sympatrically in a Cerrado area (Bahia, Brazil) / Galhas entomógenas em três espécies de Copaifera L. (Leguminosae, Caesalpinioideae) que ocorrem em simpatria em área de Cerrado (Bahia, Brasil)

Abstract The aim of this study was to characterize galls of three species of the Copaifera genus (C. sabulicola, C. luetzelburgii and C. depilis), which occur sympatrically in a Cerrado area from Bahia state. A total of 23 gall morphotypes were found, 9 morphotypes on C. sabulicola, 7 on C. luetzelburgii and 7 on C. depilis. Galls predominated on leaves and stems. The most abundant colours found among galls were brown and green. Regarding the period of the year, from 35,511 leaflets analysed, 16,322 were collected in the dry season and 19,189 in the rainy season. In the dry season, 1,635 leaflets having galls were observed, and the highest proportion was observed on C. luetzelburgii (16.31%). In relation to the rainy season, there is statistical difference in the incidence of leaflets with galls between C. sabulicola and C. depilis, these two species are affected differently during the rainy season. In general, most of the gall morphotypes were more abundant in the dry season. The gallers of 18 morphotypes cannot be determined, because the gall samples were collected occupied by parasitoids or without dwellers. Cecidomyiids induced galls in five morphotypes. Associated invertebrates belonging to the orders Hymenoptera, Diptera, Coleoptera and Acari were found among all gall morphotypes. The results obtained here indicate that the three species of Copaifera have an expressive number of galls, but lower than reported in the literature for C. langsdorffii, which is considered a super host.

Resumo O objetivo deste trabalho foi caracterizar as galhas de três espécies do gênero Copaifera (C. sabulicola, C. luetzelburgii e C. depilis) que ocorrem em simpatria no Cerrado do Estado da Bahia. Um total de 23 morfotipos de galhas foi encontrado, sendo 9 morfotipos em C. sabulicola, 7 em C. luetzelburgii e 7 em C. depilis As galhas predominaram nas folhas e caules e os morfotipos com coloração marrom e verde foram os mais abundantes. Em relação à época do ano, do total de 35.511 folíolos analisados, 16.322 foram coletados no período seco e 19.189 no chuvoso. Na estação seca foram observados 1.635 folíolos com galhas, sendo que a maior proporção de folíolos galhados foi observada em C. luetzelburgii (16.31%). Já em relação à estação chuvosa, há diferença estatística na incidência de folíolos com galhas entre C. sabulicola e C. depilis, estas duas espécies são afetadas diferentemente durante a estação chuvosa. De forma geral, a maioria dos morfotipos foi mais abundante na estação seca. Os galhadores de 18 morfotipos não foram determinados, porque as galhas coletadas apresentavam parasitóides ou estavam vazias. Os cecidomiídeos foram os responsáveis pela indução de cinco morfotipos. Os invertebrados associados às galhas pertencentes às ordens Hymenoptera, Diptera, Coleoptera e Acari. Os resultados obtidos neste estudo apontam que as três espécies de Copaifera possuem um número expressivo de galhas, porém menor que o relatado na literatura para C. langsdorffii, a qual é considerada uma super hospedeira.

Acaricidal activity of ethanolic extracts of Stryphnodendron adstringens and Lafoensia pacari and oil resins from Copaifera sp. and Pterodon emarginatus against Sarcoptes scabiei var. suis / Atividade acaricida dos extratos etanólicos de Stryphnodendron adstringens Mart. e Lafoensia pacari A. St Hil., bem como das óleo-resinas de Copaifera sp. e Pterodon emarginatus Vogel, 1837 contra Sarcoptes scabiei var. suis

In vitro bioassay using Sarcoptes scabiei as a test microorganism is a viable method of study for diverse drugs with acaricidal properties. A great amount of assays proves the diverse and efficient biological activity of extracts and compounds from Brazilian savanna plants. This study had as main object, test and compare the acaricidal activity of four Brazilian Cerrado bioproducts: Stryphnodendron adstringens Mart., Copaifera sp., Lafoensia pacari A. St Hil. and Pterodon emarginatus Vogel, 1837. To perform this test S. scabiei mites were collected from crusts removed on ears of highly infected sows. The mites were selected and separated in Petri dishes with three different concentrations (25, 50 and 75%) of each bioproduct, to evaluate their potential acaricidal activity. The mortality of the mites was counted in each Petri dish every hour, during five hours. The statistical analyses demonstrated differences between the bioproducts tested. The oleoresin of Copaifera sp. and P. emarginatus presented the best results with 100% of mites mortality after treatment. The ethanolic extracts of S. adstringens and L. pacari demonstrated lower acaricidal activity when compared to the oleoresins, with little or no difference among the control groups tested. This bioassay demonstrated to be efficient, reliable, low cost and easy accomplishment. Oil resins from Copaifera sp. and P. emarginatus have in vitro acaricidal activity against adult females of S. scabiei var. suis.(AU)

O uso de Sarcoptes scabiei como microrganismo teste para bioensaio in vitro é um método de estudo viável para diversas drogas acaricidas. Muitos ensaios comprovam a diversidade e eficiência de atividade biocida de extratos e componentes presentes em plantas do cerrado brasileiro. Este trabalho objetivou testar e comparar a atividade acaricida de quatro bioprodutos do cerrado brasileiro: Stryphnodendron adstringens Mart., Lafoensia pacari A. St Hil., Copaifera sp. e Pterodon emarginatus Vogel, 1837. Para este estudo, ácaros S. scabiei foram colhidos em crostas removidas de orelhas de fêmeas suínas altamente infestadas. Os ácaros foram selecionados, separados e colocados em placas de Petri com três diferentes concentrações (25, 50 e 75%) de bioprodutos, para avaliar o potencial de atividade acaricida de cada um. Foi realizada a contagem da mortalidade dos ácaros em cada placa de Petri a cada hora, durante cinco horas. As análises estatísticas demonstraram diferenças entre os bioprodutos testados. As óleo-resinas de Copaifera sp. e P. emarginatus apresentaram os melhores resultados, com 100% de mortalidade dos ácaros após tratamento. Os extratos etanólicos de S. adstringens Mart. e L. pacari demonstraram menor atividade acaricida quando comparados as óleo-resinas, com pequena ou nenhuma diferença entre os resultados dos grupos controle. Este ensaio demonstrou ser uma ferramenta eficiente, confiável, de baixo custo e de fácil realização. As óleo-resinas Copaifera sp. e P. emarginatus possuem atividade acaricida in vitro sobre fêmeas adultas de S. scabiei var. suis.(AU)

Avaliação da transmissibilidade ultrassônica do gel fitoterápico de Copaifera duckei Dwyer / Evaluation of ultrasonic transmission of Copaifera duckei Dwyer herbal gel

Esse estudo teve por objetivo avaliar o potencial de transmissibilidade ultrassônica de um gel fitoterápico de copaíba da espécie Copaifera duckei Dwyer na concentração de 10%. A pesquisa foi registrada junto ao Sistema Brasileiro de Biodiversidade. O gel fitoterápico de Copaifera duckei 10% foi manipulado de acordo diretrizes da Farmacopéia Brasileira e testado em um aparelho de Ultrassom (US) operado na faixa de 1 MHz. Como grupos controle foram selecionados a água destilada e o gel hidroalcoólico. A análise ocorreu de forma qualitativa e quantitativa através do modelo proposto na literatura. O US foi programado para modos de corrente pulsado/contínuo e testados nas intensidades (0,2/0,4/0,6/0,8/1,0W/cm2), em 1mim/cm2. Os dados receberam tratamento estatístico pelo software BioEstat 5.3 e foi admitido um nível de significância de ≥0,05. No modo contínuo e na intensidade de 0.2W/cm2 o gel foi considerado "Bom transmissor", na intensidade de 0.4 W/cm2 e 0.6W/cm2 um "Transmissor moderado" e nas intensidades de 0.8W/cm2 e 1.0W/cm2 um "Transmissor pobre". Concluiu-se que o gel de C. duckei 10% não atenuou as ondas de US em nenhum modo ou intensidade testado. E pode assim ser adicionado a esse para tratamentos sendo considerado transmissor bom ou moderado de acordo com a intensidade do US.(AU)

This study aimed to evaluate the potential of transmissibility of an herbal gel of Copaifera duckei Dwyer at a concentration of 10%. The research was registered with the Brazilian Biodiversity System. The gel of Copaifera duckei 10% was guidelined by the Brazilian Pharmacopoeia and tested on an Ultrasound device (US) operated in the range of 1 MHz. The control groups were selected distilled water and hydro alcoholic gel. The analysis was qualitatively and quantitatively using the model proposed in the literature. The US was scheduled to current modes pulsed/continuous and tested in the intensities (0.2/0.4/0.6/0.8/1.0W/cm2) in 1mim/cm2. The data received statistical treatment by BioEstat software 5.3 and was admitted to a significance level of ≥0.05. In continuous mode and intensity of 0.2W/cm2 gel was considered "good transmitter" at the intensity of 0.4W/cm2 and 0.6W/cm2 a "moderate Transmitter" and the intensity of 0.8W/cm2 and 1.0W/cm2 a "poor transmitter". It was concluded that the 10% gel C. duckei US did not attenuate US waves in any form or intensity tested; it can thus be used for this treatment being considered a good or moderate transmitter according to the intensity of US.(AU)

Estudo comparativo da ação anti-inflamatória do óleo-resina da Copaifera reticulata em modelos farmacológicos experimentais em camundongos / Comparative study of oleoresin of copaiba species Copaifera reticulata as antiinflammatory in experimental models in mice

Na Região Amazônica o uso do óleo das árvores copaibeiras é tão extenso, que a copaíba se destaca como a planta medicinal mais utilizada e conhecida pela população amazônica. Existem diversas indicações para a utilização do óleo-resina de copaíba com pouco respaldo científico. Avaliar a ação do óleo-resina de copaíba da espécie Copaifera reticulata como antiinflamatório em modelos experimentais de reação inflamatória aguda foi o objetivo desta pesquisa. Para isso, foram utilizados 4 grupos de 7 camundongos da linhagem Swiss Webster, que receberam tratamento veiculado com o ultrassom, e o óleo-resina extraído de árvore da espécie Copaífera reticulata. O modelo de inflamação aguda bolsa de ar (air pouch) induzida por carragenina foi utilizado para avaliar o efeito anti-inflamatório do óleo-resina de copaíba (in natura). As análises ocorreram no exsudato que foi avaliado quanto ao conteúdo total de proteínas, número total de leucócitos e análise celular. Para análise estatística foi eleito o teste de Kruskal-Wallis com nível de significância alfa = 0,05. As células totais e as mononucleares não mostraram diferenças estatisticamente significantes entre si nem em relação ao grupo copaíba. A comparação do nível de proteínas apresentou diferença significativa (p-valor < 0,01) entre o grupo controle (0,2608 ± 0,1557) e o grupo tratado por carragenina (0,597 ± 0,152). Foi observada diferença real (1,4 neutrófilos) entre os grupos carragenina (2,0079 ± 1,5231) e o grupo copaíba (0,6063 ± 0,32). Conclui-se que a atividade anti-inflamatória do óleo-resina é potencialmente importante como fonte de princípios ativos e que o ultrassom proporcionou a facilitação e aceleração da penetração transcutânea do óleo-resina de copaíba, favorecendo o seu uso tópico. (AU)

In the Amazon region the use of oil of copaibeira trees is so extensive that the copal stands out as the most known medicinal plant used by Amazonian population. There are several indications for the use oleoresin of copaiba with little scientific backing. The aim of this study was to evaluate the effects of oleoresin of copaiba species Copaifera reticulata as antiinflammatory in experimental models of acute inflammatory reaction. For this, we used 28 mice of Swiss Webster strain, who received treatment with ultrasound aired, and oleoresin extracted from Copaifera reticulata. The model of acute inflammation air pouch induced by carrageenan was used to evaluate the anti-inflammatory effect of oleoresin of copaiba (fresh). The analysis occurred in the exudate analyzed for total protein content, total number of leukocytes and cell analysis. For statistical analysis was elected the Kruskal-Wallis test with significance level alpha = 0.05. Total cells and mononuclear cells showed no statistically significant differences among themselves or in relation to the group copal. The comparison of protein level showed a significant difference (p-value < 0.01 *), saline was lower (0.2608 ± 0.1557) than carrageenan (0.597 ± 0.152). Real difference was observed (1.4 neutrophils) between groups carrageenan (2.0079 ± 1.5231) and the group copaíba (0.6063 ± 0:32). We concluded that the antiinflammatory activity of the oleoresin is potentially important as a source of active ingredients and provided that ultrasound facilitation and acceleration of transcutaneous penetration of the copaiba oil, favoring its topical use. (AU)

Eficiência de óleos essenciais na qualidade sanitária e fisiológica em sementes de feijão-fava (Phaseolus lunatus L. ) / Efficiency of essential oils in the sanitary and physiological quality of lima bean seeds (Phaseolus lunatus L. )

RESUMO A espécie Phaseolus lunatus L., conhecida popularmente como feijão-fava constitui uma das alternativas de renda e alimentação para a população da região Nordeste do Brasil. Um dos problemas enfrentados são as doenças que provocam grandes perdas na produção de sementes. O presente trabalho objetivou avaliar a eficiência dos óleos essenciais de copaíba, cravo-da-índia e manjericão na redução da incidência de fungos associados às sementes de feijão-fava, e sua interferência na qualidade fisiológica. Os tratamentos foram constituídos por óleos essenciais de copaíba, cravo-da-índia e manjericão nas concentrações de 0; 1; 1,5 e 2 mL. L-1 e fungicida (Captan®). Foram utilizadas 200 sementes por tratamento. Para análise da qualidade sanitária das sementes foi adotado o método de incubação em placas de Petri contendo dupla camada de papel-filtro umedecida com ADE, sob temperatura de 20 ±2 ºC, por 7 dias. A qualidade fisiológica das sementes foi determinada com base nos testes de germinação, emergência e vigor das sementes. Para o teste germinação foi empregado método de rolo de papel germitest e na emergência osemeio foi realizado em bandejas plásticas contendo areia lavada esterilizada, em condição de casa de vegetação, e após 9 dias da instalação foi determinado o vigor com base nos resultados de índice de velocidade de germinação e emergência; comprimento da parte aérea, raiz primária e plântula; e teor de massa seca da partes aérea, raízes e plântulas de feijão-fava. O delineamento experimental foi interiamente casualizados, em esquama de fatorial simples (3x4)+1 (óleos essenciais x concentrações + fungicida), com quatro repetições de 50 sementes. Os óleos essenciais de copaíba e manjericão reduziram consideravelmente o percentual de incidência dos fungos associados as sementes de feijão-fava. O óleo essencial de cravo-da-índia na concetração de 2 mL. L-1, reduziu a qualidade fisiológica das sementes de feijão-fava.

ABSTRACT The Phaseolus lunatus L. species, popularly known as lima bean, is one of the alternative sources of income and food for the population of Northeast Brazil. One of the problems is the diseases that cause great losses in seed production. This study evaluated the effectiveness of essential oils of copaiba, clove, and basil in reducing the incidence of fungi associated with lima bean seeds, as well as the effect on their physiological quality. The treatments consisted of essential oils of copaiba, clove, and basil at concentrations of 0; 1; 1.5; and 2 mL. L-1 and fungicide (Captan®). A total of 200 seeds were used per treatment. To analyze the sanitary quality of the seeds, the method used was incubation in petri dishes containing a double layer of filter paper moistened with distilled sterilized water at a temperature of 20 ± 2°C, for seven days. The physiological quality of the seeds was determined by testing their germination, emergence, and vigor. For the germination test, the method used was a roll of Germitest paper. For the emergence, the seeds were sown in plastic trays containing washed sterilized sand in greenhouse conditions. After nine days, the vigor was determined based on the results of germination and emergence speed rates; length of the aerial part, primary root, and seedling; and dry matter content of the aerial part, roots, and seedlings of the lima beans. The experimental design was completely randomized in a simple factorial arrangement (3x4)+1 (essential oils x concentrations + fungicide) with four replications of 50 seeds. The essential oils of copaiba and basil considerably reduced the percentage of incidence of the fungi associated with lima bean seeds. The essential clove oil at 2 mL. L-1 reduced the physiological quality of the lima bean seeds.

Study of the in vitro release profile of sesquiterpenes from a vaginal cream containing Copaifera duckei Dwyer (Fabaceae) oleoresin.

Copaiba trees and their oleoresin is an important natural product used as an anti-inflammatory and antimicrobial drug, in particular for gynecological infections. The in vitro release profile of sesquiterpenes in a vaginal cream containing copaiba (CVC – copaiba vaginal cream) oleoresin in buffered solutions at different pHs was evaluated in the present study. The dissolution test revealed that trans-caryophyllene (TC) was constantly released until the final test time. The maximum peaks were found at a concentration of 478.79 nL/mL for the buffer at pH 5 and at a concentration of 475.99 nL/mL for the buffer at pH 6, with a percentage release of 50.52% and 50.21%, respectively. Likewise, the caryophyllene oxide (CO) was released into the buffers at pHs 5 and 6, with maximum release peaks at 60 minutes at a percentage of 31.8% and 33.5% corresponding to concentrations of 2.779 and 2.925 μg/mL, respectively. The release and dissolution profiles of the sesquiterpene compounds indicated that a pH of 5-6 in the dissolution media is adequate for release of these markers of antimicrobial activity in Copaifera duckei Dwyer. Therefore, these conditions possibly favor the therapeutic action of CVC.

Effects of the oral treatment with Copaifera multijuga oil on reproductive performance of male Wistar rats

Copaiba oil, extracted from Copaifera multijuga Hayne, Fabaceae, is widely used for medicinal purposes, especially to treat inflammatory processes. However, there is no report regarding its effect on reproductive performance after used in repeated doses orally. The present study evaluated the effects of the oral administration of Copaiba oil (at doses of 200, 500 or 2500 mg/kg) or water (control) for eight weeks in male Wistar rats. Treated males mated untreated females, and parameters as fertility rates, absolute and relative mass of accessory sexual organs and histology and development of the offspring were evaluated. Chemical analysis revealed the presence of 22 components accounting for 99.11% of the Copaiba oil. The main compounds identified were sesquisterpenes. The reproductive toxicology results indicate that there was no difference between the treated groups compared with the control group in any of the parameters, suggesting that the oral treatment with C. multijuga oil for eight weeks does not affect reproductive performance of male Wistar rats.

Logging impacts on forest structure and seedling dynamics in a Prioria copaifera (Fabaceae) dominated tropical rain forest (Talamanca, Costa Rica) / Impactos de la extracción en la estructura y la dinámica de plántulas en un bosque tropical dominado por Prioria copaifera (Fabaceae), (Talamanca, Costa Rica)

The factors that determine the existence of tropical forests dominated by a single species (monodominated forests) have been the subject of debate for a long time. It has been hypothesized that the low frequency of disturbances in monodominated forests and the tolerance to shade of the monodominant species are two important factors explaining the prolonged dominance of a single species. We determined the role of these two factors by examining the effects of logging activities on the floristic composition and seedling dynamics in a Prioria copaifera dominated forest in Southeastern Costa Rica. We determined the floristic composition for trees ≥2.5cm DBH and the associated recruitment, survival and mortality of tree canopy seedlings in two sites logged two (L-02) and 12 years (L-12) prior to sampling and an unlogged forest (ULF). Our results showed that L-02 stands had lower species richness (25 species) than the L-12 and ULF stands (49 and 46 species, respectively). As expected, we found significant logging effects on the canopy structure of the altered forests, particularly when comparing the L-02 and the ULF stands. Seedling density was higher in ULF (0.96 seedlings/m²) than in the L-02and L-12 stands (0.322 and 0.466 seedlings/m², respectively). However, seedling mortality was higher in the ULF stands (54%) than in the L-02 (26%) and L-12 (15%) stands. P. macroloba in L-02 was the only species with abundant regeneration under P. copaifera in L-02 stand, where it accounted for 35% of the seedlings. Despite the reduction in seedling abundance observed after logging, P. copaifera seems to maintain large seedling populations in these forests, suggesting that this species maintains its dominance after logging disturbances. Our findings challenge the hypothesis that the regeneration of monodominant species is not likely to occur under heavily disturbed canopy conditions. Rev. Biol. Trop. 62 (1): 347-357. Epub 2014 March 01.

La determinación de los factores responsables de la existencia de bosques tropicales dominados por una sola especie (bosques monodominados) ha sido motivo de debate por largo tiempo. Se ha propuesto que la baja frecuencia de alteraciones en esos bosques y la tolerancia a la sombra de las plántulas de la especie monodominante son dos de los factores que contribuyen a explicar la prolongada dominancia de una sola especie en estos bosques. Se estudió el rol de estos dos factores evaluando el efecto de la extracción de madera sobre la composición florística y la supervivencia y crecimiento de plántulas en un bosque dominado por Prioria copaifera en la región sureste de Costa Rica. Para ello se determinó la composición florística de los árboles con un diámetro a la altura de pecho (DAP) ≥2.5cm y el reclutamiento, supervivencia y mortalidad de las plántulas de especies arbóreas en sitios donde se extrajo madera dos (L-02) y doce años (L-12) antes de este estudio y un sitio del que nunca se ha extraído madera (ULF). Nuestros resultados muestran que los bosques L-02 tienen una riqueza de especies menor (25 especies) que los bosques L-12 y ULF (49 y 46 especies, respectivamente). Como era de esperar, la extracción de madera tuvo efectos significativos en la estructura del dosel del bosque, particularmente al comparar los bosques L-02 y ULF. La densidad de plántulas fue mayor en bosques ULF (0.96 plántulas/m²) que en L-02 y L-12 (0.322 and 0.466 plántulas/m², respectivamente). Sin embargo, la mortalidad de plántulas fue mayor en ULF (54%) que en L-02 (26%) y L-12 (15%). Pentachletra macroloba fue la única especie que mostró abundante regeneración bajo P. copaifera en parcelas L-02, representando el 35% las plántulas encontradas. A pesar de la reducción de la abundancia de plántulas observada después de la extracción de madera, P. copaifera parece capaz de mantener grandes poblaciones de plántulas en estos bosques. Estos resultados sugieren que P. copaifera puede mantener su dominancia después de las alteraciones causadas por la extracción de madera. Nuestros resultados no apoyan la hipótesis de que la regeneración de las especies monodominates es menos probable cuando el dosel del bosque sufre fuertes alteraciones.

Atividade larvicida do ácido 3-B-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico isolado da planta medicinal copaifera reticulata (leguminosae) sobre aedes aegypti (diptera, culicidae) evidenciada pelas alterações morfohistológicas / Larvicidal activity of 3-Beta-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-oic acid isolated from the medicinal plant Copaifera reticulata against Aedes aegypti shown by morphohistological changes

O principal mecanismo de controle do dengue tem sido por meio da eliminação do Aedes aegypti, seu transmissor mais competente. Este mecanismo consiste, principalmente, na destruição dos criadouros potenciais, na educação sanitária e no uso de inseticidas sintéticos. Estes inseticidas apresentam eficiência, mas são altamente tóxicos aos vertebrados e ao meio ambiente. Com o aparecimento da resistência dos mosquitos a essas substâncias, abre-se uma oportunidade aos inseticidas de origem botânica. Neste estudo, apresentam-se os mecanismos da atividade larvicida do ácido 3-Beta-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-oico, extraído da planta medicinal Copaifera reticulata Ducke (Leguminosae), sobre larvas de terceiro estádio de Ae. aegypti. As larvas foram submetidas a uma solução do ácido a 9ppm, por até 24 horas. Aquelas que atingiram estado letárgico foram coletadas e fixadas em paraformaldeído a 4 por cento, em tampão cacodilato de sódio 0.1M pH 7.2, incluídas em resina, e as lâminas, coradas pela técnica de hematoxilina-eosina e analisadas por microscopia de luz. O ácido causou a morte das larvas pela destruição celular do intestino médio, por meio de vacuolização citoplasmática, hipertrofia celular e nuclear, degeneração do bordo em escova, formação vesicular apical com liberação de conteúdo citoplasmático, estratificação do epitélio e dobras na matriz peritrófica.

The main mechanism of control of dengue has been through the fight against Aedes aegypti, the most competent vector. The fight primarily consists of elimination of its potential breeding sites, health education and use of synthetic insecticides. These insecticides are effective but are highly toxic to vertebrates and the environment. With the emergence of resistance of mosquitoes to them, insecticides of botanical origin are being explored. This study looks at the larvicidal activity of a solution of a solution of 3-Beta-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico acid extracted from the medicinal plant Copaifera reticulata Ducke (Leguminosae) on the 3rd stage larvae of Ae. aegypti. Larvae were subjected to 9 ppm acid for up to 24 h. Those that reached lethargic state were collected and fixed in 4 percent paraformaldhyde in 0.1 M sodium cacodilate buffer, pH 7.2, included in resin and the slides stained with the hematoxylin-eosin technique and examined by light microscopy. This acid caused the death of the Ae. aegypti larvae by cell destruction in the midgut, by the high cytoplasmic vacuolation, cell and nuclear hypertrophy, degeneration of the brush edge, apical vesicular formation with release of cytoplasmic contents of cells, stratification of the epithelium and folds in the peritrophic matrix.

Qualidade sanitária e germinação de sementes de copaíba / Sanitary quality and germination of copaiba seeds

Copaifera langsdorffii Desf. pode ser empregada na arborização urbana e na recuperação de áreas degradadas, mas carece de informações sobre análise da qualidade de sementes para a formação de mudas. O objetivo foi determinar a população fúngica associada às sementes, testar métodos para a eliminação desses microrganismos e avaliar a influência desses procedimentos sobre a germinação. Foi realizado o teste de sanidade (método do papel de filtro e do meio BDA), tratamento de sementes (NaClO 2% por 0, 5, 10, 15 e 20 minutos) e o teste de germinação (BOD a 25oC com luz contínua). Os métodos de incubação em papel de filtro e em meio BDA podem ser usados para detecção de fungos em sementes de copaíba, mas o meio BDA é mais eficaz;; o uso de hipoclorito de sódio na concentração de 2% por períodos de 10, 15 ou 20 minutos é capaz de eliminar fungos presentes em sementes de copaíba, entretanto, o período de 15 minutos pode apresentar melhores resultados.

Copaifera langsdorffii Desf. can be used to urban arborization and recomposition of degraded area, but need information about its seed quality to seedlings formation. The aim were determine fungi population associated with seeds, try methods to eliminate it and evaluate the influence of these procedures in seeds germination. Were realized the sanitary test (blotter test and BDA medium),seed treatment (NaClO 2% during 0, 5, 10, 15 and 20 minutes) and germination test (BOD at 25oC with constant light). Blotter test and BDA medium can be used to detect fungi in C. langsdorffi seeds, but BDA is most efficient; NaClO 2% during 10, 15 and 20 minutes is able to eliminate fungi at seeds, but 15 minutes can present best results.

Atividade antimicrobiana do oleorresina de copaíba (Copaifera reticulata) frente a Staphylococcus coagulase positiva isolados de casos de otite em cães / Antimicrobial activity of copaiba oil (Copaifera reticulata) against coagulase positive Staphylococcus of canine otitis

The aim of this study was to investigate the antimicrobial activity of the oleoresin Copaifera reticulata Ducke against Staphylococcus coagulase positive (SCP) isolated from otitis externa in dogs. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of the oleoresin were determined by broth microdilution method. In addition, we verified the antimicrobial susceptibility profile of the isolates of SCP by agar diffusion method. Eight classes of antimicrobial were used to calculate the multidrug resistance. The chemical composition of the oleoresin was performed by gas chromatography coupled to the mass spectrometry (GC/MS), and β-caryophyllene, β-bisabolene, and (E)-α-bergamotene were the main compounds found. The copaiba oleoresin showed a MIC90 of 0.164mg/mL and a CBM90 of 1.3mg/mL. The multidrug resistance was found in 27% of the strains tested. The results suggest that copaiba oleoresin has bacteriostatic and bactericidal activity even in multidrug-resistant coagulase-positive strains.

O objetivo do presente trabalho foi investigar o potencial antimicrobiano do oleorresina de Copaifera reticulata Ducke em isolados de Staphylococcus coagulase positiva (SCP) provenientes de casos de otite externa em cães. O método de microdiluição em caldo foi utilizado para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) de oleorresina de copaíba. Em adição, foi determinado o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos dos isolados de SCP pelo método de difusão em ágar. Oito classes de antimicrobianos foram usadas para o cálculo de multirresistência antimicrobiana. A determinação da composição química do oleorresina de copaíba foi realizada por cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC/MS), sendo que β-cariofileno, β-bisaboleno e (E)-α-bergamoteno foram os compostos majoritários. O oleorresina de copaíba demonstrou CIM90 de 0,164mg/mL e CBM90 de 1,31mg/mL. A multirresistência foi verificada em 27% das cepas testadas. Os resultados sugerem que o oleorresina de copaíba exerceu atividade bacteriostática e bactericida mesmo em cepas multirresistentes de Staphylococcus coagulase-positiva.

Copaifera multijuga ethanolic extracts, oil-resin, and its derivatives display larvicidal activity against Anopheles darlingi and Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Copaifera spp. is a common tree species found in the tropical region of Latin America, popularly known as copaiba or pau-d'alho. Oil-resin from different Copaifera species and its components present several biological activities such as antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant and insecticidal, including larvicidal activity against mosquitoes. Thus, bark and leaf ethanolic extracts, oil-resin, essential oil and alepterolic acid from Copaifera multijuga Hayne, Fabaceae, were tested as larvicides against the main malaria vector in the north of Brazil, Anopheles darlingi and also Aedes aegypti, the dengue vector. A. darlingi larval mortality was significantly higher than A. aegypti for most tested compounds. Bark and leaf extracts resulted in lower Lethal Concentrations (LC50) values for A. darlingi, 3 and 13 ppm, respectively, while the essential oil provided the lowest LC50 value for A. aegypti, 18 ppm. Despite of that, the lowest LC values were from the alepterolic acid for both species, i.e. 0.9 and 0.7 ppm for A. darlingi and A. aegypti, respectively.

Antileishmanial activity of diterpene acids in copaiba oil

Leishmaniasis is a neglected tropical disease. According to the World Health Organization, there are approximately 1.5-two million new cases of cutaneous leishmaniasis each year worldwide. Chemotherapy against leishmaniasis is based on pentavalent antimonials, which were developed more than a century ago. The goals of this study were to investigate the antileishmanial activity of diterpene acids in copaiba oil, as well as some possible targets of their action against Leishmania amazonensis. Methyl copalate and agathic, hydroxycopalic, kaurenoic, pinifolic and polyaltic acids isolated from Copaifera officinales oleoresins were utilised. Ultrastructural changes and the specific organelle targets of diterpenes were investigated with electron microscopy and flow cytometry, respectively. All compounds had some level of activity against L. amazonensis. Hydroxycopalic acid and methyl copalate demonstrated the most activity against promastigotes and had 50% inhibitory concentration (IC50) values of 2.5 and 6.0 µg/mL, respectively. However, pinifolic and kaurenoic acid demonstrated the most activity against axenic amastigote and had IC50 values of 3.5 and 4.0 µg/mL, respectively. Agathic, kaurenoic and pinifolic acid caused significant increases in plasma membrane permeability and mitochondrial membrane depolarisation of the protozoan. In conclusion, copaiba oil and its diterpene acids should be explored for the development of new antileishmanial drugs.

Medicinal plant extracts on the control of Diabrotica speciosa (Coleoptera: Chrysomelidae) / Extratos de plantas medicinais no controle de Diabrotica speciosa (Coleoptera: Chrysomelidae)

The aim of this study was to evaluate the insecticidal effect of aqueous, alcoholic, and oil extracts from leaves of eight medicinal plants against Diabrotica speciosa prepared at five concentrations. The extracts that used commercial soybean oil as solvent showed the highest D. speciosa mortality due to the solvent itself, regardless of the used plants and their concentrations. Thus, commercial soybean oil was discarded as solvent since at these volumes it would cause serious phytotoxicity problems. After 24 hours of exposure of the pest to the extracts, the highest D. speciosa mortality values were observed for Copaifera langsdorfii and Chenopodium ambrosioides extracts, both in 5% alcohol, and Artemisia verlotorum, in 10% water. However, in the last mortality assessment (48 h), C. langsdorfii extract in 5% alcohol showed higher mortality of this pest, followed by C. ambrosioides extract in 5% alcohol, compared to the remaining plants.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito inseticida de extratos aquosos, alcoólicos e oleosos de folhas de oito plantas medicinais contra Diabrotica speciosa preparadas em cinco concentrações. Os extratos que utilizaram óleo de soja comercial como solvente apresentaram as maiores mortalidades de D. speciosa em função do próprio óleo, independentemente das plantas utilizadas em suas concentrações. Sendo assim, o óleo de soja comercial foi descartado como solvente, pois nestes volumes acarretaria sérios problemas de fitotoxidade. Após 24 horas de exposição da praga aos extratos, os maiores valores de mortalidade de D. speciosa foram observados nos extratos de Copaifera Langsdorfii e de Chenopodium ambrosioides, ambos em álcool 5%, e de Artemisia verlotorum, em água 10%. Entretanto, na última avaliação de mortalidade (48 h), o extrato de C. langsdorfii em álcool a 5% apresentou maior mortalidade dessa praga, seguida pelo extrato alcoólico a 5% de C. ambrosioides comparada às demais plantas.

Antimicrobial activity of copaíba (Copaifera langsdorffii) oleoresin on bacteria of clinical significance in cutaneous wounds / Atividade antimicrobiana do óleo-resina de copaíba (Copaifera langsdorffii) em bactérias de significância clínica em úlceras cutâneas

The present study was designed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Copaifera langsdorffii oleoresin, which has been used in folk medicine as an anti-inflammatory, antibacterial, healing among others. The oleoresin was tested against Gram-positive (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) and Gram-negative (Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli) bacteria related to infections in cutaneous wounds. Antimicrobial activity was determined by the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) assays. Copaiba oleoresin showed antimicrobial activity only against the Gram-positive bacteria with MIC of 200 µg/mL, 400 µg/mL and 1100 µg/mL for S. aureus, S. pyogenes and E. faecalis, respectively. MBC values were the same as MIC for S. aureus and S. pyogenes and for E. faecalis it was 1200 µg/mL. Considering that infection significantly impairs the wound healing process, we believe that the use of copaiba oleoresin as a component of a topical formulation could be a valuable adjunct in the treatment of infected wounds, mainly in the case of wounds infected by Gram-positive microorganisms.

Este trabalho avaliou a atividade antimicrobiana in vitro do óleo-resina da Copaifera langsdorffii, o qual vem sendo utilizado há muitos anos na medicina tradicional popular, principalmente devido às suas propriedades antiinflamatórias, antibacterianas, cicatrizante entre outras. O óleo-resina foi testado em bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) e Gram-negativas (Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli) relacionadas com infecções de úlceras cutâneas. A atividade antimicrobiana foi determinada pelos testes da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). O óleo-resina apresentou atividade antimicrobiana in vitro apenas para as bactérias Gram-positivas, com valores de CIM de 200 µg/mL, 400 µg/mL e 1100 µg/mL para S. aureus, S. pyogenes e E. faecalis, respectivamente. Os valores de CBM foram os mesmos que os valores de MIC para S. aureus e S. pyogenes. O valor de CBM para o microrganismo E. faecalis foi de 1200 µg/mL. Considerando que a presença de infecção significativamente impede o processo normal de cicatrização de úlceras cutâneas, acreditamos que o óleo-resina de copaíba, utilizado como componente de formulações tópicas, poderia ser um adjunto importante no tratamento de úlceras cutâneas infectadas, principalmente nos casos de infecção por microrganismos Gram-positivos.

Parâmetros fisiológicos de mudas de copaíba sob diferentes substratos e condições de sombreamento / Physiological parameters in seedlings of copaiba under different shade conditions and substrates

O presente trabalho teve como objetivo avaliar parâmetros fisiológicos de mudas de copaíba produzidas sob o efeito de diferentes níveis de sombreamento e tipos de substratos. O experimento teve a duração de 130 dias e foi conduzido em blocos casualizados no esquema fatorial 5x4, com cinco substratos: Bioplant®; 70% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada; 40% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada + 30% fibra de coco; 50% vermiculita + 30% casca de arroz carbonizada + 20% areia; 70% vermiculita + 15% casca de arroz carbonizada + 15% vermicomposto de resíduo de indústria têxtil; quatro níveis de sombreamento (100, 70, 50 e 30% do pleno sol) e três repetições. O nível de sombreamento de 50% em relação ao pleno sol possibilitou a produção de mudas de copaíba com maiores teores de clorofila b e clorofila total, além de proporcionar os menores valores de transpiração diária e ao longo do dia das plantas. A área foliar, os teores de clorofila e a transpiração das mudas de copaíba independem do tipo de substrato, podendo ser produzidas em qualquer um dos meios de crescimento avaliados.

This research aimed to evaluate physiological parameters of seedlings of copaiba produced under the effect of different shading levels and types of substrates. The experiment lasted 130 days and was conducted in randomized blocks in factorial scheme 5x4 with five substrates: Bioplant®, 70% vermiculite + 30% rice hulls, 40% vermiculite + 30% rice charred hulls + 30% fiber coconut, 50% vermiculite + 30% rice charred hulls + 20% sand, 70% vermiculite + 15% rice charred hulls + 15% vermicompost residue of textile industry; four shading levels (100, 70, 50 and 30% full sun) and three replications. The shade level of 50% compared to full sun, enabled the production of seedlings of Copaiba with higher concentrations of chlorophyll b and total chlorophyll, and provided the lowest daily transpiration throughout the day and the plants. The leaf area, chlorophyll content and transpiration of seedlings of Copaiba independent of the substrate and can be produced in any of the growth media evaluated.